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ReproEasy?人體細胞重編程培養基
ReproEasy?人體細胞重編程培養基是賽貝生物(Cellapy?)開發的一款適用于無飼養層、 化學成分明確的人體細胞重編程完全培養基。
ReproEasy?支持人體細胞重編程,不含血清,無動物源成分,并具有重編程效率高,重復性強等優點。
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ReproEasy?重編程過程簡圖:
人尿液腎上皮細胞(高倍)
重編程因子導入尿液上皮細胞后鋪到Matrigel上, 經ReproEasy?培養基3天后出現小克隆
ReproEasy?培養基繼續培養至第4天,克隆增殖明顯
ReproEasy?培養第7天,會出現比較典型的hESC樣克隆
ReproEasy?培養9-10天,hESC樣克隆持續增殖
ReproEasy?培養12-15天,hESC樣克隆足夠致密,可以進行克隆的挑取,培養基換為PSCeasy ?培養基
ReproEasy?部分引用文獻:
Generation and periodontal differentiation of human gingival fibroblasts-derived integration-free induced pluripotent stem cells.Biochemical and Biophysical Research Communications xxx (2015) 1e7.(DOI:10.1016/j.bbrc.2015.10.012)
貨號:CA5001500
規格:500mL
儲存條件:基礎培養基2 ~ 8℃,添加劑-80 ~ -20℃,混勻后2 ~ 8℃,2周內使用完畢。
產品簡介:
ReproEasy?人體細胞重編程培養基是賽貝生物(Cellapy?)開發出的一種適用于無飼養層誘導、化學成分明確、并且無動物源成分的人體細胞重編程完全培養基。ReproEasy?培養基是在James Thomson實驗室開發的Essential 8培養基的基礎上,由賽貝生物改良研發出的最新型體細胞重編程完全培養基。
產品內容:
組分代碼 | 名稱 | 規格 | 數量 |
CA5001500-1 | ReproEasy?基礎培養基 | 500mL | 1瓶 |
CA5001500-2 | ReproEasy?添加劑 | 7mL | 1支 |
ReproEasy培養基可以用于哪些種類的體細胞的重編程?
ReproEasy 培養基適用于所有類型的人體細胞的重編程。
ReproEasy培養基可以支持哪些重編程方法?
ReproEasy 重編程體系適合目前所有的重編程因子導入方式,包括逆轉錄/慢病毒感染、質粒轉染、 質粒電轉、仙臺病毒感染等。
在ReproEasy誘導重編程體系中,可觀察到怎樣的重編程過程?
使用 ReproEasy 培養基誘導重編程,總共需要 15 ~ 25 天。過程中可以依次觀察到以下變化:第 1~ 3 天,體細胞快速增殖;第 5 ~ 7 天,部分區域出現上皮樣細胞聚集并持續增大;第 10 ~ 15 天,出 現典型的人 ESC 樣克隆;第 15 ~ 25 天,人 ESC 樣的克隆長大,可以進行克隆的挑取。
培養基中有沉淀狀物質是否是質量問題?
添加劑在解凍過程中,若有少量沉淀析出,屬于正常現象,不影響使用。但添加劑不能在 37℃解凍, 否則會析出大量沉淀,影響培養基的效價。如果培養基中出現大量沉淀,請不要使用。
是否能在37℃預熱ReproEasy完全培養基?
不能。頻繁地在 4℃和 37℃之間轉換會導致 ReproEasy 完全培養基中含有的因子失活,ReproEasy 完全培養基在使用前平衡至室溫即可。
在ReproEasy誘導重編程體系中,細胞接種的初始密度是多少?
細胞接種的初始密度應當為 2×103 ~ 5×103/cm2。如果使用六孔板,接種的初始密度為 2×104 ~ 5×104/孔。
在ReproEasy誘導重編程體系中,細胞是否需要傳代?
如果長時間未觀察到細胞形變,細胞生長至匯合度≧90%,可以用 0.5mM EDTA 傳代工作液按 1:3 的比例傳代到 Matrix 包被的新的皿/瓶中。但傳代會導致最后挑取的單克隆可能來自同一個起始細 胞,無法得到嚴格意義上的單克隆,并無法計算重編程效率。如果出現中途細胞匯合度過大的情況, 建議降低細胞接種的初始密度。
重編程完成后,應用什么體系培養得到的人iPSC?
推薦在 PSCeasy 培養體系中培養人 iPSC。PSCeasy 人多潛能干細胞培養基是一種適用于無飼養層培 養、化學成分明確、并且不含動物源蛋白的人 ESC/iPSC 完全培養基。
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