ReproEasy培養基可以用于哪些種類的體細胞的重編程？

ReproEasy 培養基適用于所有類型的人體細胞的重編程。

ReproEasy培養基可以支持哪些重編程方法？

ReproEasy 重編程體系適合目前所有的重編程因子導入方式，包括逆轉錄/慢病毒感染、質粒轉染、 質粒電轉、仙臺病毒感染等。

在ReproEasy誘導重編程體系中，可觀察到怎樣的重編程過程？

使用 ReproEasy 培養基誘導重編程，總共需要 15 ~ 25 天。過程中可以依次觀察到以下變化：第 1~ 3 天，體細胞快速增殖；第 5 ~ 7 天，部分區域出現上皮樣細胞聚集并持續增大；第 10 ~ 15 天，出 現典型的人 ESC 樣克隆；第 15 ~ 25 天，人 ESC 樣的克隆長大，可以進行克隆的挑取。

培養基中有沉淀狀物質是否是質量問題？

 添加劑在解凍過程中，若有少量沉淀析出，屬于正常現象，不影響使用。但添加劑不能在 37℃解凍， 否則會析出大量沉淀，影響培養基的效價。如果培養基中出現大量沉淀，請不要使用。

是否能在37℃預熱ReproEasy完全培養基？

不能。頻繁地在 4℃和 37℃之間轉換會導致 ReproEasy 完全培養基中含有的因子失活，ReproEasy 完全培養基在使用前平衡至室溫即可。

在ReproEasy誘導重編程體系中，細胞接種的初始密度是多少？

細胞接種的初始密度應當為 2×103 ~ 5×103/cm2。如果使用六孔板，接種的初始密度為 2×104 ~ 5×104/孔。

在ReproEasy誘導重編程體系中，細胞是否需要傳代？ 

如果長時間未觀察到細胞形變，細胞生長至匯合度≧90%，可以用 0.5mM EDTA 傳代工作液按 1:3 的比例傳代到 Matrix 包被的新的皿/瓶中。但傳代會導致最后挑取的單克隆可能來自同一個起始細 胞，無法得到嚴格意義上的單克隆，并無法計算重編程效率。如果出現中途細胞匯合度過大的情況， 建議降低細胞接種的初始密度。

重編程完成后，應用什么體系培養得到的人iPSC？

推薦在 PSCeasy 培養體系中培養人 iPSC。PSCeasy 人多潛能干細胞培養基是一種適用于無飼養層培 養、化學成分明確、并且不含動物源蛋白的人 ESC/iPSC 完全培養基。